中欧体育最新地址

产品中心
PRODUCT CENTER
产品中心 数字PCR技术路线概述
数字PCR技术路线简要介绍
数字PCR技术作为新一代PCR技术,市场前景广阔,应用领域众多,临床需求明确,由此受到国际巨头和国内新锐公司的青睐。目前整个数字PCR市场已进入成长期,资本关注度越来越高。但同质化以及是否具有核心技术仍需值得重点关注。

第一代PCR技术在扩增后,通过凝胶电泳进行分析,仅可获得定性结果。

直到20世纪90年代,伴随着生物荧光技术的发展,实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR, qPCR)应运而生,并成为核酸定量检测的第二代PCR主流技术,沿用至今。由于qPCR为大体积反应系统,存在较多的背景干扰,无法获得绝对定量结果,随着检测要求的提高,qPCR逐渐无法满足临床一些超高灵敏度、精密度的检测要求。

至20世纪末,Vogelstein 等提出第三代数字PCR( digitalPCR,dPCR) 的概念,将一个样本分充分稀释,分配到不同的反应单元,每个单元包含少于或等于一个拷贝的目标分子( DNA 模板) ,在每个反应单元中进行单独、平行的PCR反应,扩增结束后收集捕获各个反应单元的荧光信号数字PCR的精髓所在!)进行泊松分布数字PCR另一个精髓统计学分析,以实现绝对定量及稀有等位基因的检测。



如何收集捕获反应单元的荧光信号?

由于众所周知的技术壁垒原因,目前市面上存在两种技术路线:以Bio-Rad和中欧体育最新地址生物为主的流式计数逐滴收集捕获反应单元荧光信号技术路线和以传统荧光定量PCR收集捕获荧光信号的芯片式CCD拍照技术路线。




流式计数逐滴收集捕获技术路线解决问题的着眼点是如何精准、高效地收集捕获反应单元荧光信号;芯片式CCD拍照技术路线解决问题的着眼点是如何制备反应单元的问题;

如何制备反应单元(微滴或微孔液滴)?

目前芯片式CCD拍照技术路线有两个方案,其中一个是将芯片凿孔,然后将反应体系物理涂抹,采取物理分割原理制备于微孔内,其制备质量和数量均受限,很难突破20,000个以上;另一个方案是基于微流控技术,将反应体系“
油包水”液相分割制备反应单元,制备反应单元均匀度好,然后将制备好的反应单元自由平铺于芯片上,此法在制备数量上也是受限,基本在20,000-30,000个之间。

流式计数逐滴收集捕获技术路线也是采用微流控技术,将反应体系“油包水”液相分割制备反应单元。中欧体育最新地址生物样本制备仪可制备多达100,000个微滴以上,而且有效微滴可达70,000个以上,非常符合“泊松分布”的胃口,故中欧体育最新地址生物是既解决了微滴制备问题,又解决了微滴荧光信号采集捕获的问题。


  • 邮 编 : 510000
  • 电 话 : 400-8298-906
  • 地 址 : 广州国际生物岛螺旋三路6号第四层

官方微信

官方微信
Copyright © 中欧体育最新地址生物科技有限公司.