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ITRAQ定量分析

产品概述

蛋白质是生理功能的执行者,是生命现象的直接体现者,对蛋白质结构和功能的研究能更加直接和准确的阐明生命体在不同生理或病理条件下的变化机制。iTRAQ技术是基于稳定同位素标记和生物质谱发展起来的高通量蛋白定量技术。一次实验可对8个样本中的蛋白质进行鉴定和定量,具有通量大、准确度高的特点,适合多样本的研究。与高通量测序和代谢组学技术的联合应用是挖掘药物代谢、疾病发生发展等相关生物标志物的重要手段。


技术路线



重要参数指标

样品要求


样品要求:新鲜组织、细胞等

样本总量:蛋白总量不低于200ng

 

平台系统

Thermo Scientific Q Exactive AB SCIEX TripleTOFTM 5600



案例分析

瓣膜置换手术多数是由于退行性主动脉瓣膜狭窄(AS)引起的。主动脉瓣是一个薄的、复杂的、分层的结缔组织,并带有由特化的细胞产生的含有腔室的细胞外基质,能够控制心脏血液按一个方向流动。有研究表明,在主动脉瓣狭窄病变过程中细胞外基质会发生重塑。因此,对胞外基质蛋白的研究能够进一步加深我们对AS分子机制的理解。本研究利用iTRAQ定量蛋白质组学技术在主动脉病变患者瓣膜中找到13个差异表达的胞外基质蛋白,并通过SRM和WB验证了其中3个重要蛋白的表达,一定程度上揭示了主动脉瓣膜病变中的分子机制。


图1. 差异蛋白的功能聚类和相互作用分析


Agnieszka Rybak-wolf,et al.Cricular RNAs in the Mammalian Brain Are Highly Abundant,Conserved,and Dynamically Expressed.Moelcullar Cell,2015.



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